@article { author = {Shojaosadati, Seyed Abbas and Khalilzadeh, Rasoul and Mohammadian, Jafar and Khani, Vajiheh}, title = {Development of a Cost Effective Purification Method for Human Epidermal Growth Factor (hEGF) in Recombinant Escherichia coli}, journal = {Nashrieh Shimi va Mohandesi Shimi Iran}, volume = {34}, number = {2}, pages = {111-117}, year = {2015}, publisher = {Iranian Institute of Research and Development in Chemical Industries (IRDCI)-ACECR}, issn = {1022-7768}, eissn = {}, doi = {}, abstract = {Human Epidermal Growth Factor (hEGF) with 53 amino acids and a molecular weight of 6.2 KD is a protein that stimulates the growth of various cell types. The purpose of this study was to apply a novel method for purification of the recombinant hEGF that was expressed in recombinant Escherichia coli BL21(DE3). The recombinant strain produced hEGF in form of intracellular so it was necessary to disrupt cell wall of recombinant E. coli and then purify hEGF from inclusion body. Renaturation and purification protocol, which was used in this study, was a simple and efficient one that had three stages including unfolding, purification by means of ultrafiltration and centrifugation and finally refolding of unfolded rhEGF molecules. SDS-PAGE and Reverse Phase High Performance Liquid Chromatography (RP-HPLC) were used as analytical methods to investigate the results. The purified protein was analyzed by SDS-PAGE and RP-HPLC and the results were shown more than 99% purity.}, keywords = {Recombinant human epidermal growth factor (rhEGF),Purification,Recombinant Escherichia coli,Ultrafiltration}, title_fa = {ابداع روشی کم‌هزینه و دقیق برای خالص‌سازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF)}, abstract_fa = {فاکتور رشد اپیدرمی(EGF) انسانی با 53 اسید آمینه و وزن مولکولی 2/6 کیلو دالتون، پروتئینی با قابلیت تحریک رشد چندین نوع سلول است و به دلیل همین ویژگی در موارد پزشکی و تهیه فراورده‌ های آرایشی کاربردهای بسیاری دارد. در این پژوهش، ابتدا پلاسمید pET23a(+) حاوی ژن EGF به باکتری اشرشیاکلی سویه BL21(DE3) منتقل شد که سویه نوترکیب به دست آمده قادر به تولید فاکتور رشد اپیدرمی انسانی به صورت درون‌ریز بود. روند خالص‌ سازی استفاده شده در این پژوهش، روشی آسان و به صرفه و دارای سه مرحله اصلی شامل بازکردن تاخوردگی مولکولی و واسرشتگی مولکول‌ها، خالص‌ سازی پایانی به روش فراتصفیه و ایجاد تاخوردگی دوباره مولکول‌های جداشده می‌باشد. در این پژوهش، از روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا در ستون فاز وارون در کنار آزمایش SDS-PAGE برای سنجش نتیجه‌ های مرحله‌های گوناگون خالص‌سازی استفاده شد. درآخرین مرحله خالص ‌سازی نتیجه‌ه ای هردو آزمایش نشان‌دهنده خلوص بالا برای پروتئین جداشده می‌باشد.}, keywords_fa = {فاکتور رشد اپیدرمی انسانی,خالص‌سازی,نوترکیب,اشرشیاکلی,فراتصفیه,تا خوردگی دوباره}, url = {https://www.nsmsi.ir/article_16868.html}, eprint = {https://www.nsmsi.ir/article_16868_e130cc41cb89e27e78bf127936771062.pdf} }