شجاع الساداتی, سید عباس, خلیل زاده, رسول, محمدیان, جعفر, خانی, وجیهه. (1394). ابداع روشی کمهزینه و دقیق برای خالصسازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF). نشریه شیمی و مهندسی شیمی ایران, 34(2), 111-117.
سید عباس شجاع الساداتی; رسول خلیل زاده; جعفر محمدیان; وجیهه خانی. "ابداع روشی کمهزینه و دقیق برای خالصسازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF)". نشریه شیمی و مهندسی شیمی ایران, 34, 2, 1394, 111-117.
شجاع الساداتی, سید عباس, خلیل زاده, رسول, محمدیان, جعفر, خانی, وجیهه. (1394). 'ابداع روشی کمهزینه و دقیق برای خالصسازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF)', نشریه شیمی و مهندسی شیمی ایران, 34(2), pp. 111-117.
شجاع الساداتی, سید عباس, خلیل زاده, رسول, محمدیان, جعفر, خانی, وجیهه. ابداع روشی کمهزینه و دقیق برای خالصسازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF). نشریه شیمی و مهندسی شیمی ایران, 1394; 34(2): 111-117.
ابداع روشی کمهزینه و دقیق برای خالصسازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF)
1تهران، دانشگاه تربیت مدرس، دانشکده مهندسی شیمی، گروه بیوتکنولوژی، صندوق پستی 114 ـ 14115
2تهران، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، پژوهشکده علوم و فناوری زیستی
3یزد، سازمان جهاد دانشگاهی استان یزد، گروه پژوهشی سرامیک صنعتی، صندوق پستی 89415145
چکیده
فاکتور رشد اپیدرمی(EGF) انسانی با 53 اسید آمینه و وزن مولکولی 2/6 کیلو دالتون، پروتئینی با قابلیت تحریک رشد چندین نوع سلول است و به دلیل همین ویژگی در موارد پزشکی و تهیه فراورده های آرایشی کاربردهای بسیاری دارد. در این پژوهش، ابتدا پلاسمید pET23a(+) حاوی ژن EGF به باکتری اشرشیاکلی سویه BL21(DE3) منتقل شد که سویه نوترکیب به دست آمده قادر به تولید فاکتور رشد اپیدرمی انسانی به صورت درونریز بود. روند خالص سازی استفاده شده در این پژوهش، روشی آسان و به صرفه و دارای سه مرحله اصلی شامل بازکردن تاخوردگی مولکولی و واسرشتگی مولکولها، خالص سازی پایانی به روش فراتصفیه و ایجاد تاخوردگی دوباره مولکولهای جداشده میباشد. در این پژوهش، از روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا در ستون فاز وارون در کنار آزمایش SDS-PAGE برای سنجش نتیجه های مرحلههای گوناگون خالصسازی استفاده شد. درآخرین مرحله خالص سازی نتیجهه ای هردو آزمایش نشاندهنده خلوص بالا برای پروتئین جداشده میباشد.