• صفحه اصلی
  • مرور
    • شماره جاری
    • بر اساس شماره‌های نشریه
    • بر اساس نویسندگان
    • بر اساس موضوعات
    • نمایه نویسندگان
    • نمایه کلیدواژه ها
  • اطلاعات نشریه
    • درباره نشریه
    • اهداف و چشم انداز
    • اعضای هیات تحریریه
    • همکاران دفتر نشریه
    • اصول اخلاقی انتشار مقاله
    • بانک ها و نمایه نامه ها
    • پیوندهای مفید
    • پرسش‌های متداول
    • فرایند پذیرش مقالات
    • اخبار و اعلانات
  • راهنمای نویسندگان
  • ارسال مقاله
  • داوران
  • تماس با ما
 
  • ورود به سامانه ▼
    • ورود به سامانه
    • ثبت نام در سامانه
  • English
صفحه اصلی فهرست مقالات مشخصات مقاله
  • ذخیره رکوردها
  • |
  • نسخه قابل چاپ
  • |
  • توصیه به دوستان
  • |
  • ارجاع به این مقاله ارجاع به مقاله
    RIS EndNote BibTeX APA MLA Harvard Vancouver
  • |
  • اشتراک گذاری اشتراک گذاری
    CiteULike Mendeley Facebook Google LinkedIn Twitter Telegram
نشریه شیمی و مهندسی شیمی ایران
مقالات آماده انتشار
شماره جاری
شماره‌های پیشین نشریه
دوره دوره 36 (1396)
دوره دوره 35 (1395)
دوره دوره 34 (1394)
شماره شماره 4
شماره شماره 3
شماره شماره 2
شماره شماره 1
دوره دوره 33 (1393)
دوره دوره 32 (1392)
دوره دوره 31 (1391)
دوره دوره 30 (1390)
شجاع الساداتی, سید عباس, خلیل زاده, رسول, محمدیان, جعفر, خانی, وجیهه. (1394). ابداع روشی کم‌هزینه و دقیق برای خالص‌سازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF). نشریه شیمی و مهندسی شیمی ایران, 34(2), 111-117.
سید عباس شجاع الساداتی; رسول خلیل زاده; جعفر محمدیان; وجیهه خانی. "ابداع روشی کم‌هزینه و دقیق برای خالص‌سازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF)". نشریه شیمی و مهندسی شیمی ایران, 34, 2, 1394, 111-117.
شجاع الساداتی, سید عباس, خلیل زاده, رسول, محمدیان, جعفر, خانی, وجیهه. (1394). 'ابداع روشی کم‌هزینه و دقیق برای خالص‌سازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF)', نشریه شیمی و مهندسی شیمی ایران, 34(2), pp. 111-117.
شجاع الساداتی, سید عباس, خلیل زاده, رسول, محمدیان, جعفر, خانی, وجیهه. ابداع روشی کم‌هزینه و دقیق برای خالص‌سازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF). نشریه شیمی و مهندسی شیمی ایران, 1394; 34(2): 111-117.

ابداع روشی کم‌هزینه و دقیق برای خالص‌سازی فاکتور رشد اپیدرمی انسانی نوترکیب (hEGF)

مقاله 10، دوره 34، شماره 2 - شماره پیاپی 76، تابستان 1394، صفحه 111-117  XML اصل مقاله (775 K)
نوع مقاله: کوتاه پژوهشی
نویسندگان
سید عباس شجاع الساداتی 1؛ رسول خلیل زاده2؛ جعفر محمدیان2؛ وجیهه خانی* 3
1تهران، دانشگاه تربیت مدرس، دانشکده مهندسی شیمی، گروه بیوتکنولوژی، صندوق پستی 114 ـ 14115
2تهران، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، پژوهشکده علوم و فناوری زیستی
3یزد، سازمان جهاد دانشگاهی استان یزد، گروه پژوهشی سرامیک صنعتی، صندوق پستی 89415145
چکیده
فاکتور رشد اپیدرمی(EGF) انسانی با 53 اسید آمینه و وزن مولکولی 2/6 کیلو دالتون، پروتئینی با قابلیت تحریک رشد چندین نوع سلول است و به دلیل همین ویژگی در موارد پزشکی و تهیه فراورده‌ های آرایشی کاربردهای بسیاری دارد. در این پژوهش، ابتدا پلاسمید pET23a(+) حاوی ژن EGF به باکتری اشرشیاکلی سویه BL21(DE3) منتقل شد که سویه نوترکیب به دست آمده قادر به تولید فاکتور رشد اپیدرمی انسانی به صورت درون‌ریز بود. روند خالص‌ سازی استفاده شده در این پژوهش، روشی آسان و به صرفه و دارای سه مرحله اصلی شامل بازکردن تاخوردگی مولکولی و واسرشتگی مولکول‌ها، خالص‌ سازی پایانی به روش فراتصفیه و ایجاد تاخوردگی دوباره مولکول‌های جداشده می‌باشد. در این پژوهش، از روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا در ستون فاز وارون در کنار آزمایش SDS-PAGE برای سنجش نتیجه‌ های مرحله‌های گوناگون خالص‌سازی استفاده شد. درآخرین مرحله خالص ‌سازی نتیجه‌ه ای هردو آزمایش نشان‌دهنده خلوص بالا برای پروتئین جداشده می‌باشد.
کلیدواژه‌ها
فاکتور رشد اپیدرمی انسانی؛ خالص‌سازی؛ نوترکیب؛ اشرشیاکلی؛ فراتصفیه؛ تا خوردگی دوباره
موضوعات
زیست فناوری
مراجع

[1] Sharma K., Cherish Babu P.V., Sasidhar  P., Srinivas V.K., Krishna Mohan V., Krishna Ella, Recombinant Human Epidermal Growth Factor Inclusion Body Solubilization and Refolding at Large Scale using Expanded-Bed Adsorption Chromatography from Escherichia coli, Protein Expression and Purification, 60: 7-14 (2008).

[2]  Huang R.C., Lam E., Chen Y.H., Hackett J, Lam T.L., Liu D., Ma M.C., Siu K.L., Sivakesava S., Xu Z.N., Wong R.S.C. Wong W.K.R., Human Epidermal Growth Factor Excreted by Recombinant Escherichia coli K-12 has the Correct N-Terminus and is Fully Bioactive, Process Biochem., 35: 1-5 (1999).

[3] شجاع‌الساداتی، سید عباس؛ خلیل‌زاده، رسول؛ محمدیان، جعفر؛ "کلونینگ و بیان فاکتور رشد اپیدرمی انسانی در باکتری اشرشیاکلی"، گزارش پروژه تحقیقاتی، صفحات2-20 (1386).

[4] Heo J.H., Won H.S., Kang H.A., Rhee S.K. Chung B.H., Purification of Recombinant Human Epidermal Growth Factor Secreted from the Methylotrophic Yeast Hansenula Polymeorpha, Protein Expression and Purification, 24: 117-122 (2002).

[5] Soler L.F., Cedano J., Querol E. Liorens R., Cloning, Expression and Purification of Human Epidermal Growth Factor using Different Expression Systems, Journal of Chromatography, 788: 113-123 (2003).

[6] Finkenaur, “Stabilized Compositions Containing Epidermal Growth Factor”, US Patent References, Publication Number EP 0267015 A2 (1988).

[7] Mount C.D., Lukas T.J., Orth D.N., Purification and Characterization of Epidermal Growth Factor and Epidermal Growth Factor Fragments from Large volumes of Human Urine, Arch Biochem. Biophys., 240: 33-42 (1985).

[8] Lee J.Y., Chang S.Y., Chung Y., Lee Y.S. Lee E.K., Scale-up Process for Expression and Renaturation of Recombinant Human Epidermal Growth Factor from Escherichia coli Inclusion Bodies, Biotechnol. Appl. Biochem., 31: 245-248 (2000).

[9] Lee Y.S., Suh C.W., Park S.K. Lee E.K., Purification of Soluble Human Epidermal Growth Factor (hEGF) from Recombinant Escherichia coli Culture Broth by Using Expanded-Bed Adsorption Chromatography, Biotechnol. Appl. Biochem., 38: 9-13 (2003).

[10] Abdull Razis A.F., Ismail E.N., Hambali Z., Abdullah M.N.H., Ali A.M. Mohd Lila M.A.,The Periplasmic Expression of Recombinant Human Epidermal Growth Factor (hEGF) in Escherichia coli, Asia Pacific Journal of Molecular Biology and Biotechnology, 14: 41-45 (2006).

[11] اسفندیار، سمانه؛ "خالص سازی اینترلوکین-2 تولید شده در باکتری اشرشیاکلی نوترکیب"، پایان‌نامه کارشناسی ارشد، دانشگاه تربیت ­مدرس (1387).

[12] Getz E.B., Xiao M., Chakrabarty T., Cooke R. Selvin P.R., A Comparison between the Sulfhydryl Reductants Tris(2-carboxyethyl)phosphine and Dithiothreitolfor Use in Protein Biochemistry, Analytical Biochem., 273: 73-80 (1999).

[13] Reddya G.B., Narayananb S., Reddya P.Y., Suroliab I., Suppression of DTT-Induced Aggregation of Abrin by KA- and KB-Crystallins: a Model Aggregation Assay for K-Crystallin Chaperone Activity in Vitro, Federation of European Biochemical Societies, 522: 59-64 (2002).

[14] Stevan Jovanovich, Carol J. Tillis, David L. Barker, “Handbook of Protein Purification”, Amersham Pharmacia Biotech, Uppsala Sweden (2001).

آمار
تعداد مشاهده مقاله: 979
تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 453
صفحه اصلی | واژه نامه اختصاصی | اخبار و اعلانات | اهداف و چشم انداز | نقشه سایت
ابتدای صفحه ابتدای صفحه

Get a counter.

Journal Management System. Designed by sinaweb.